我們總結(jié)的食用菌滅菌鍋爐平菇菌種提純法簡(jiǎn)便易行，污染率低，很適于設(shè)備簡(jiǎn)陋的農(nóng)村應(yīng)用

1. 褶片貼附分離法

利用成熟菇體的菌蓋所產(chǎn)生的孢子進(jìn)行培養(yǎng)而獲得純正菌種。其過(guò)程是：首先制備好PDA試管斜面培養(yǎng)基。配備培養(yǎng)基的用品是馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、水1000毫升。將試管存放在14℃～18℃環(huán)境中干燥2天～3天，當(dāng)試管壁上沒(méi)有游離水珠時(shí)，即可進(jìn)行分離，方法是：選用菇形圓整、菌蓋肥厚、健壯、無(wú)病蟲(chóng)危害、七八成熟的平菇作為分離菌種原材料，在黑暗處借用手電筒的光束，可看到形似白色粉筆灰狀的孢子彈射的狀況。平菇孢子的成熟次序是由基部，即靠近菇體菌柄的一端呈帶狀向前緣推移，在其菌蓋前緣隆起處便是孢子彈射最活躍的部位，在此處剪一段，約1厘米～1.5厘米寬的菌褶，用鑷子剝?nèi)?片菌褶，并用75%酒精涂抹消毒，再將其貼到斜面試管上方的管壁上，并立即豎放到廣口瓶或紙盒內(nèi)。

在瓶或盒底部放一層棉花（最好用脫脂消毒棉），固定住試管，以防止試管滑動(dòng)。然后輕輕調(diào)整試管方向，使表面呈凸凹放射狀排列的菌褶面向試管內(nèi)的斜面培養(yǎng)基，以便彈射孢子能自由降落到培養(yǎng)基上。

在18℃溫度下，一般放置12小時(shí)，斜面培養(yǎng)基上即可看到與呈放射狀排列的菌褶形狀相似的模糊的孢子印。此時(shí)，在無(wú)菌接種室或接種箱內(nèi)，用接種鉤將貼附的菌褶取出并塞上無(wú)菌脫脂棉塞。封閉管口，以免落下成熟過(guò)遲的孢子，然后豎立在26℃溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。3天后，孢子呈棉花團(tuán)狀萌發(fā)，10天左右，菌絲即可長(zhǎng)滿試管斜面。然后再在無(wú)菌接種室或箱內(nèi)，用接種針將載有菌絲的小塊移入另一斜面試管培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)，這樣重復(fù)2次，進(jìn)行無(wú)雜菌培養(yǎng)。經(jīng)感官鑒定：分離培養(yǎng)的菌種菌絲密集、粗壯有力，氣生菌絲發(fā)達(dá)，爬壁性強(qiáng)，不分泌色素，菌絲生長(zhǎng)速度快，耐高溫，在34℃溫度下照常生長(zhǎng)而不發(fā)黃，25℃溫度下約8天可長(zhǎng)滿試管斜面，在低溫下保存易形成籽實(shí)體。通過(guò)出菇試驗(yàn)，證明這種方法產(chǎn)量高、周期短、抗雜菌污染能力強(qiáng)，可選擇出優(yōu)良菌株并作為原始純菌種轉(zhuǎn)擴(kuò)再用于生產(chǎn)。

2. 孢子快速分離法

在乎菇孢子大量散發(fā)出現(xiàn)煙霧狀時(shí)，可采用醫(yī)用注射器進(jìn)行孢子快速分離而獲得純菌種。平菇孢子分離的菌種生理年齡小，生活力旺盛，常被當(dāng)作菌種復(fù)壯的方法之一。

具體方法如下：

① 用100毫升的醫(yī)用注射針管和長(zhǎng)針頭，經(jīng)75%酒精消毒后，吸入40毫升的無(wú)菌水。

② 推出注射器中的空氣，將針管頭插入菇體孢子彈射的煙霧圈中，拔出針頭，將針管后拉，使煙霧中的部分孢子隨針頭管后拉的吸力進(jìn)入管內(nèi)，然后立即插上針頭并晃動(dòng)針管，使吸入的孢子與無(wú)菌水混合均勻，即成孢子液。

③ 用酒精棉球擦試針頭后，將針頭插穿PDA培養(yǎng)基斜面試管上的棉塞，稍壓推管，滴入3滴孢子液在斜面培養(yǎng)基上，輕輕晃動(dòng)試管使其均勻鋪開(kāi)在斜面上。

④ 將斜面試管水平置于24℃～26℃下培養(yǎng)，待孢子萌發(fā)時(shí)，挑選無(wú)雜菌污染、潔白、健壯的菌絲，在無(wú)菌接種室或接種箱內(nèi)轉(zhuǎn)管2次，進(jìn)行純化培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)出菇試驗(yàn)后，選擇優(yōu)良菌株作為純種。