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南陽市臥龍區(qū)盛隆鍋爐廠
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在食用菌制種和栽培上,因各種原因引起的雜菌污染屢見不鮮。供暖鍋爐廠家各種雜菌(如霉菌和細(xì)菌)幾乎無一例外地都是競爭性的,它們和食用菌生活在同一培養(yǎng)基上,爭奪食用菌的營養(yǎng)和生活空間,影響食用菌的生長;許多雜菌還通過產(chǎn)生一些有毒物質(zhì)來抑制食用菌菌絲的生長。從某種意義上來說,食用菌制種和栽培的中心工作就是如何來防止和控制各種雜菌的污染,以獲得菌絲體或栽培體的純培養(yǎng)。在生產(chǎn)上搞好雜菌污染的防止和控制,其中重要的一環(huán)就是接種工作。筆者根據(jù)多年來從事食用菌工作的經(jīng)驗,對接種所引起的污染及防止措施分析如下,供同行參考。
1接種箱滋生霉菌引起的污染
也許有人會認(rèn)為,接種箱是用于接種的設(shè)備,要經(jīng)常消毒,而且每次使用前都要經(jīng)過消毒處理,怎么也會生長霉菌呢?其實,這是一種誤解。首先,接種箱多為木質(zhì)結(jié)構(gòu),木材中含有豐富的木質(zhì)纖維素,它是各種霉菌生活的良好營養(yǎng)成分;其次,接種箱的使用隨生產(chǎn)而具有季節(jié)性,每年都有較長一段時間閑置未用,在這段時間內(nèi),就極有可能出現(xiàn)霉菌污染。那么,在什么情況下接種箱才會出現(xiàn)霉菌污染呢?接種箱被污染多是出現(xiàn)在接種箱閑置未使用的時候,但筆者認(rèn)為,引起污染的直接原因往往并不在這段時間,而是在生產(chǎn)季節(jié)接種箱被使用的時候。在使用接種箱時,生產(chǎn)者操作不規(guī)范或使用不當(dāng)都會使接種箱過于潮濕,比如讓培養(yǎng)基或菌料等撒落箱內(nèi)而沒有及時清理,或者由于接種箱內(nèi)外溫差較大,引起箱內(nèi)而沒有及時清理,或者由于接種內(nèi)外溫差較大,引起箱內(nèi)熱空氣遇冷凝結(jié)成水珠等。接種箱受潮后,如果沒有及時通風(fēng)排濕,這樣在接種箱閑置不使用的時候,就很容易滋生霉菌。
針對上述引起接種箱污染的原因,要防止污染,在實際工作中,一是要在接種箱使用時,盡量降低接種箱內(nèi)的濕度。要避免培養(yǎng)基、菌料或酒精棉球等直接落入箱內(nèi),如不謹(jǐn)?shù)羧胂鋭t應(yīng)盡快清理;
要避免接種箱內(nèi)外出現(xiàn)溫差而引起受潮,具體應(yīng)做到:
(1)料袋或料瓶滅菌后應(yīng)充分冷卻再進入接種箱內(nèi)進行消毒處理,以免引起接種箱內(nèi)溫度過高;
(2)消毒劑的用量要嚴(yán)格按照規(guī)定使用。目前常見的消毒劑如氣霧消毒劑、福爾馬林等,在使用時都是利用這些物質(zhì)發(fā)生氧化反應(yīng)來產(chǎn)生煙霧或蒸汽,從而達到對空氣消毒的目的。我們知道,氧化反應(yīng)往往會產(chǎn)生大量的熱量,因此,在保證消毒效果的前提下,消毒劑的使用不宜過量;
(3)提高接種速度,控制好接種時間。接種速度慢、時間長,不僅工作效率低、生產(chǎn)周期長,而且酒精燈長時間燃燒會產(chǎn)生大量的熱量,使箱內(nèi)溫度過高。此外,接種時間長,也會延長培養(yǎng)基、菌種等在空氣中暴露的時間,這樣會增加雜菌污染的機會。二是在接種箱長期閑置不用時,應(yīng)將接種箱箱蓋、袖套口及時打開,以利通風(fēng)排濕。實際上,在生產(chǎn)上要完全避免接種箱受潮往往是很難做到的,但問題的關(guān)鍵是當(dāng)生產(chǎn)季節(jié)結(jié)束以后,就應(yīng)及時進行通風(fēng)降濕,并將接種箱放置在通風(fēng)干燥的地方。
如果接種箱已經(jīng)出現(xiàn)了霉菌污染,那么又如何處理呢?在實際工作中,有些生產(chǎn)者對這個問題往往重視不夠,或者根本就沒有意識到這個問題,在使用接種箱時仍按照常規(guī)的方法進行消毒處理(殊不知在消毒劑的使用濃度和消毒時間不延長的情況下,消毒劑的消毒效果與空氣中的雜菌的數(shù)量是密切相關(guān)的),結(jié)果往往就會“不明”原因的大規(guī)模污染。接種箱出現(xiàn)霉菌污染以后,實現(xiàn)要用酒精棉球或蘸有福爾馬林的棉球擦拭肉眼可見的霉菌,然后,再用福爾馬林進行熏蒸或用氣霧消毒劑消毒,這樣連續(xù)處理2次-3次以后才能使用。
2接種操作引起的污染
接種在食用菌制種和栽培上是非常重要的環(huán)節(jié),對控制好雜菌污染至關(guān)重要。接種時要求生產(chǎn)者應(yīng)嚴(yán)格掌握微生物無菌操作規(guī)程,概括起來,主要有以下幾點:
2.1各種接種工具和用品等應(yīng)隨同料袋、料瓶、菌種等一并進行消毒處理,應(yīng)當(dāng)盡量避免在操作過程中向箱內(nèi)傳遞物品。
2.2進箱操作前,在箱外用清水洗凈雙手,進箱后再用酒精棉球擦拭雙手和接種工具,并對接種工具用火焰灼燒滅菌,在接種過程中還要定期用火焰滅菌。
2.3對于試管種的擴大培養(yǎng),試管應(yīng)平持,試管口不能朝上,同時試管口也不要離開酒精燈火焰,這樣才能達到火焰“封口”的目的。
2.4接種操作要做到“輕、快、準(zhǔn)”?!拜p”是指接種時動作幅度不要太大,以減少空氣波動;“快”是指動作操作要快,避免菌種和培養(yǎng)基在空氣中暴露時間過長;“準(zhǔn)”指的是接種動作要準(zhǔn)確到位,接種工具、菌種塊等不要到處亂撞、亂放。
2.5接種操作完畢,及時移走物品,并將箱內(nèi)收拾干凈。
3接種箱空氣引起的污染
接種箱內(nèi)空氣中雜菌孢子或微生物菌體數(shù)量直接影響到接種后培養(yǎng)物的純菌率。引起箱內(nèi)空氣污染的原因是多方面的,如消毒不徹底、接種箱密封性能差等。其中,消毒不徹底是引起箱內(nèi)空氣污染的最常見原因。消毒不徹底可能是由于消毒劑本身的原因引起的,比如,消毒劑效果差、用藥量不夠等,也有可能是由于長時間使用同一種消毒劑(長期使用同一種消毒劑引起消毒效果差,其原因如果能排除消毒劑本身的質(zhì)量問題,從生物學(xué)的角度來說,往往是由于消毒劑對雜菌抗藥性變異的定向選擇作用,從而是雜菌抗藥性種群不斷增大。鑒于此,生產(chǎn)上應(yīng)注意不同的消毒劑輪換使用)。此外,接種箱密封性能差也是造成空氣消毒不徹底的原因之一。