13937731171
南陽市臥龍區(qū)盛隆鍋爐廠
全國服務熱線: 400-0120-867
地址: 河南省南陽市
龍升工業(yè)園
電話::13937731171
15236033339
18749093311
13271390566
聯(lián)系人: 劉廠長
Q Q: 173579012
郵箱: nanyangguolu@sina.com
網(wǎng)址:1230385.com
食用菌滅菌鍋爐培養(yǎng)基雖然種類繁多,配方各異,但配制方法基本相同,都要經(jīng)過營養(yǎng)物質的選擇、稱量調配、調節(jié)pH、分裝和滅菌等步驟。
(1)營養(yǎng)物質的選擇:
平菇一級種培養(yǎng)基的選擇是根據(jù)一級種的用途和當時材料獲得的難易決定的。如配制生產(chǎn)用的一級種培養(yǎng)基,就可選擇上述配方中的任何一種,而配制菌種保藏用的培養(yǎng)基就必須用配方(8)。平菇一級種培養(yǎng)基使用的材料中,有些材料的種類、濃度、化學成分相對穩(wěn)定,如磷酸二氫鉀、硫酸鎂等,有些天然植物體或動植物提取的成分相對不甚穩(wěn)定,要十分注意,如馬鈴薯、蛋白胨、麥麩等。
發(fā)芽的馬鈴薯不能直接使用。使用時要將剛剛出現(xiàn)的萌芽深深挖掉,否則芽眼處的龍葵堿,對平菇菌絲生長有毒害作用。出芽較大的馬鈴薯不能使用。木屑、麥麩、玉米粉、棉籽殼等農(nóng)副產(chǎn)品,使用前要認真檢查,生蟲、發(fā)霉和不新鮮的不能使用,昆蟲的代謝物和霉菌產(chǎn)生的毒素都對平菇菌絲有毒害作用。不夠潔凈的瓊脂要事先浸泡沖洗去雜。
(2)稱量:
培養(yǎng)基配方中標出的水1000ml,實際上是將各種營養(yǎng)物質都容于水后的營養(yǎng)液的容量,而不完全是水。配制好后,最后總容量達到1000ml。
(3)調配:
植物體材料煮沸用其汁,一般煮沸20~30min,用2~4層紗布過濾。如馬鈴薯、玉米粉、木屑、麥麩等。難溶解的物質先溶解,如蛋白胨,然后再加入易溶解的物質?;瘜W試劑后加入,不斷攪拌使其均勻,而不與植物體材料一起煮沸。如葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂等。
在水煮取汁的過程中,水不足時可加水至足量,調配到最后,容量不足時可加水補足至1000ml。
(4)調節(jié)pH:
不同平菇品種生長發(fā)育最適pH不同,不同地區(qū),不同水源的pH也不同。因此,需要調節(jié)。通常先用pH試紙測定已調配好的培養(yǎng)基,然后再用稀酸或稀堿溶液調節(jié)。平菇一級種的pH調節(jié)常用的酸性溶液是檸檬酸和乙酸溶液,常用的稀堿溶液是碳酸氫鈉和碳酸鈉液。
(5)分裝:
培養(yǎng)基調配好后,調節(jié)好pH即可分裝。一級種常用的是玻璃試管,規(guī)格為18~20cm(長)18~20mm(口徑)。分裝試管的裝置可以使用漏斗式分裝器,也可以自行設計使用倒“V”字形虹吸式分裝器。分裝時,在漏斗中或燒杯中加滿培養(yǎng)基。這后一種分裝器,分裝前要用吸球先將培養(yǎng)基吸至低于燒杯中培養(yǎng)基的液面,然后才能分裝。一手執(zhí)自由夾控制培養(yǎng)基的流動,另一手執(zhí)試管接受流下來的培養(yǎng)基,達到所需量時,關閉自由夾。如此反復分裝至完畢。分裝時要注意:①流出的培養(yǎng)基不要沾在近管口的壁上,以防日后棉塞生霉,一旦管口附近沾有培養(yǎng)基,待凝固后用接種鉤扒出,并用潮濕潔凈的紗布擦拭干凈;②培養(yǎng)基裝至試管的1/5~1/4處,不可過少,也不必過多。
分裝完畢后加蓋棉塞。棉塞要用干凈的新棉花制做。棉塞要上下粗細均勻,松緊合適,以塞好后手提時不掉為宜。棉塞的長度以塞入試管內1.5~2.0cm,外露1.5cm左右為宜。然后7支或10支捆成一捆,管口端用牛皮紙或防潮紙包好扎緊,以防滅菌時冷凝水打濕棉塞。
(6)滅菌:
試管分裝打捆后,豎立于滅菌鍋內滅菌。這是培養(yǎng)基制備的重要一步。滅菌效果是否良好,是關系到培養(yǎng)基能否使用的關鍵環(huán)節(jié)之一。這一步既要求滅菌徹底,又要求營養(yǎng)成分不致改變。因此,要使用高壓蒸汽滅菌。
使用高壓鍋滅菌時,要先加足水,將試管豎直碼放,加蓋擰好,然后接通熱源加熱。由于不同型號的高壓鍋內部構造不完全相同,所以,使用中的操作要嚴格按產(chǎn)品說明書進行。當壓力達到0.1~0.11MPa開始計時,保持這一壓力30min,即可達到滅菌目的。滅菌完畢后,待壓力降至零后排氣、開蓋,將培養(yǎng)基趁熱擺成斜面。待凝固后,抽取10~20支試管斜面于28℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24~28h,以檢查滅菌效果。培養(yǎng)后若培養(yǎng)基表面無微生物生長,表明滅菌成功,可以使用。如有微生物出現(xiàn),則滅菌不徹底,不能使用,要再行滅菌后倒出,洗滌試管,重新制備。當時不用的試管斜面可保存在清潔干燥避光的地方,以備隨時取用。制備一級種培養(yǎng)基時,配制和滅菌要緊密銜接,不可隔夜滅菌。
可以用來制備平菇一級種的培養(yǎng)基很多,常用的有PDA培養(yǎng)基、PDA綜合培養(yǎng)基、PDYA綜合培養(yǎng)基、PDPA綜合培養(yǎng)基、木屑綜合培養(yǎng)基、麥麩綜合培養(yǎng)基、玉米粉綜合培養(yǎng)基等。