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南陽市臥龍區(qū)盛隆鍋爐廠
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浴室供暖鍋爐同一平菇品種經(jīng)過四年以上栽培就會表現(xiàn)出一些退化現(xiàn)象。如出菇遲,長勢弱,轉(zhuǎn)潮慢,產(chǎn)量不高等。通過平菇有性繁殖所產(chǎn)生的孢子進行母種繁殖是解決種性退化的一條有效途徑。因平菇子實體孢子彈射量大,接種操作簡易,在栽培專業(yè)戶中推廣孢子分離提純復(fù)壯技術(shù)是可行的。
1.母種孢子分離與接種
(1)采菇。選擇菇體形態(tài)好,生長勢健壯,并能代表該品種性狀接近成熟的平菇子實體,采摘一叢或兩叢作為復(fù)壯用種菇拿回室內(nèi)備用。要求所采的子實體菌蓋邊緣稍卷或已接近平展。
(2)裝置與滅菌。用0.2%新潔爾滅清洗干凈3個1000毫升燒杯和3個培養(yǎng)皿,烘干水分后將培養(yǎng)皿放入燒杯底部。切取菌蓋長達7-9厘米上層或中層的一朵平菇子實體,用藥棉蘸75%酒精輕擦菌蓋和菌柄后,將菌褶朝下放入燒杯中的培養(yǎng)皿中如有插菇鋼絲架更好。此操作完成后在燒杯口沿上蓋好用無菌水滴濕的4層沙布,上面再蓋一層白紙,用皮筋扎口,以次類推連同3個同樣處理的燒杯一起放入接種箱。接種箱中另放入30-40支PDA試管培養(yǎng)基,接種鏟、鑷子酒精燈等工具,用10毫升甲醛加6克高錳酸鉀混合后對接種箱進行熏蒸消毒滅菌。
(3)接種與培養(yǎng)。放入接種箱用于孢子分離的平菇,經(jīng)過8-12小時后就有孢子彈出,一般放一晝夜培養(yǎng)皿中就有厚厚一層白色孢子印,這時要及時進行接種。接種時雙手用75%酒精擦洗后就可進行。先取掉燒杯口上覆蓋的紙和紗布,再用鑷子夾出平菇體,取出培養(yǎng)皿用左手食指和母指夾住皿體,再取一支試管培養(yǎng)基用左手小指和無名指夾住。右手持接種鏟豎著在酒精燈上灼燒進行干熱滅菌,待冷卻后用右手小指及魚際拔出試管棉塞,用接種鏟從培養(yǎng)皿中央鏟取一些孢子接在試管培養(yǎng)基中央,隨即塞上棉塞即可。一朵菇體彈射的孢子量可接種10支以上試管種。接種完成后貼上標簽放入25℃左右的恒溫箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中,前3-4天為孢子定植期,外表看不出任何變化,7天以后孢子開始萌發(fā)并在四周長出白色絨毛狀菌絲體,16-18天左右菌絲布滿培養(yǎng)基面,即得純菌絲母種。如有污染管應(yīng)及時棄除。
2.原種擴接
選取10支菌絲潔白、粗壯、生長整齊的試管種進行原種的擴接。另20支純菌絲母種等做完出菇試驗后再作留種及相關(guān)處理。一支試管種可接5瓶原種,每支試管接完要進行火焰干熱滅菌后再擴接另一支試管。接種完畢后取出菌種瓶放入25℃左右恒溫箱培養(yǎng),菌絲滿瓶后10天左右進行出菇試驗。
3.出菇試驗
用常規(guī)棉籽殼等培養(yǎng)基。一般接種10-20袋即可。接種后在適宜溫度下發(fā)菌,菌絲長滿后移到出菇最佳條件下進行觀察。選菌絲生長速度快,吃料能力強,出菇早,朵形好,轉(zhuǎn)潮快,產(chǎn)量高,質(zhì)量好,遺傳性狀穩(wěn)定的平菇菌種所出的子實體再進行組織分離培養(yǎng),方可用于栽培生產(chǎn)。下面具體介紹一下組織分離方法。
組織分離的操作要點:
1.在菇床、菌墻中選擇出菇早、無雜菌侵染、株型緊湊、圓整肉厚、色澤美觀、七八成熟的第一潮菇的肥壯菇體作種菇;
2.在種菇中部取最大的3-4張菇片,用70%的酒精輕擦表面后置于接種箱內(nèi)消毒;
3.將菇片縱向撕開,在每個裂面靠近菇片邊緣處取一米粒大小的菇肉組織接于馬鈴薯麩皮培養(yǎng)基上。每張菇片共撕10個裂面,接10支試管,一次分離共接30-40支試管;
4.將試管置于15-30℃下培養(yǎng);
5.培養(yǎng)期間每天都要檢查發(fā)菌情況,從中選擇菌絲濃白粗壯、邊緣整齊、長速正常、無綠、黃及漿糊狀等雜菌斑點的,表現(xiàn)最好的分離種轉(zhuǎn)接于木屑麩皮培養(yǎng)基上,于15-30℃下培養(yǎng);
6.菌絲發(fā)滿后,在接種箱內(nèi)去掉棉塞,用蠟封口,用黑膜包裹后于4-9℃的冰箱內(nèi)保藏;
7.在下一個生產(chǎn)季節(jié)與原始保藏種作對比試驗,擇優(yōu)作為生產(chǎn)用種。每季都如此復(fù)壯,能逐步提高菌種各方面的性狀,使發(fā)菌加快,抗逆抗雜性增強,質(zhì)量明顯提高。