母種培育基的制造

1.　母種培育基的種類

母種是菌種出產(chǎn)的要害，要求純度高，不能混生雜菌，一起母種的菌絲體較為纖細(xì)，分化培育料的才干較弱。因而，母種菌絲體需求培育在營養(yǎng)豐厚，易被吸收，外表潤滑易于辨別有無雜菌感染的瓊脂培育基上。合適母種菌絲成長的瓊脂培育基種類許多，常用的有下列幾種：

① 馬鈴薯—葡萄糖—瓊脂培育基：　馬鈴薯（去皮） 200克 瓊脂 20克 葡萄糖（或蔗糖） 20克 水 1000毫升 

② 麥芽汁—葡萄糖—瓊脂培育基：　干麥芽 250克 瓊脂 15～20克 葡萄糖（或蔗糖） 10克 水 1000毫升 

③ 胡蘿卜—葡萄糖—瓊脂培育基：　胡蘿卜 100克 瓊脂 20克 葡萄糖（或蔗糖） 20克 水 1000毫升 

④ 蘑菇汁—葡萄糖一瓊脂培育基（適用于蘑菇）：　鮮蘑菇 250克 瓊脂 20克 葡萄糖（或蔗糖） 20克 水 1000毫升

⑤ 蛋白胨—葡萄糖—瓊脂培育基：　蛋白胨 2克 葡萄糖 20克 磷酸氫二鉀 2克 維生素B1（硫胺素） 0.5毫克 磷酸二氫鉀 0.5克 瓊脂 18克 硫酸鎂 0.5克 水 l000毫升

2.母種培育基的制法

以最常用的馬鈴薯—葡萄糖—瓊脂培育基的制法為例介紹如下：先將馬鈴薯去皮，洗刷，切成小塊加水1000毫升，煮沸15～20分鐘，取雙層紗布過濾，取其濾液，參加瓊脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加熱使其溶化，最終補(bǔ)足水分，使其容量仍為1000毫升。趁熱分裝于試管中，裝量約為試管長度的1/5左右，裝管時要留意不使培育基沾污試管壁和試管口。試管口塞上大小適合的棉花塞，塞入試管口內(nèi)的長度為棉塞總長的3/5。塞好棉塞后，每10支作一捆，用牛皮紙包扎好后，置鐵絲網(wǎng)籠中，然后進(jìn)行高壓滅菌。如作為孢子別離用，則將培育基分裝于三角瓶或培育皿中，然后高壓滅菌。

3.母種培育基的消毒滅菌

母種培育基通常用高壓蒸汽滅菌鍋來消毒滅菌，常用的高壓蒸汽滅菌鍋有直式、臥式和手提式三種。將制造好后的母種培育基移入上述任何一種高壓蒸汽滅菌鍋中，在15公斤/平方厘米 壓力下，消毒滅菌30分鐘。

高壓蒸汽滅菌首要是依托進(jìn)步蒸汽的溫度來滅菌的，因而滅菌時，應(yīng)將鍋內(nèi)的冷空氣悉數(shù)掃除。不然，雖然壓力表上的壓力已到達(dá)要求，可是，滅菌鍋內(nèi)的溫度卻未到達(dá)所需的溫度（表11）。掃除冷空氣的辦法是加熱后當(dāng)壓力表上指針上升到0.5公斤/平方厘米時，翻開排氣閥，放氣至指針仍回到“零”的方位。滅菌的時刻是以掃除冷空氣后，壓力回升到1.5公斤/平方厘米 時才開端核算。每次滅菌之后，要等壓力降到“零”時，才翻開鍋蓋，不然，滅菌的液領(lǐng)會因俄然減壓而外溢，玻璃器皿也會因俄然降溫而決裂。 

在沒有高壓蒸汽滅菌鍋設(shè)備的情況下，可用蒸鍋、蒸籠等進(jìn)行常壓滅菌。因?yàn)槊芊庑圆?，壓力升不高，溫度只能升?02℃左右因而要接連蒸4～6小時才干到達(dá)滅菌的意圖。