食用菌滅菌鍋爐培養(yǎng)基雖然種類繁多，配方各異，但配制方法基本相同，都要經(jīng)過(guò)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的選擇、稱量調(diào)配、調(diào)節(jié)pH、分裝和滅菌等步驟。

（1）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的選擇：

平菇一級(jí)種培養(yǎng)基的選擇是根據(jù)一級(jí)種的用途和當(dāng)時(shí)材料獲得的難易決定的。如配制生產(chǎn)用的一級(jí)種培養(yǎng)基，就可選擇上述配方中的任何一種，而配制菌種保藏用的培養(yǎng)基就必須用配方（8）。平菇一級(jí)種培養(yǎng)基使用的材料中，有些材料的種類、濃度、化學(xué)成分相對(duì)穩(wěn)定，如磷酸二氫鉀、硫酸鎂等，有些天然植物體或動(dòng)植物提取的成分相對(duì)不甚穩(wěn)定，要十分注意，如馬鈴薯、蛋白胨、麥麩等。

發(fā)芽的馬鈴薯不能直接使用。使用時(shí)要將剛剛出現(xiàn)的萌芽深深挖掉，否則芽眼處的龍葵堿，對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)有毒害作用。出芽較大的馬鈴薯不能使用。木屑、麥麩、玉米粉、棉籽殼等農(nóng)副產(chǎn)品，使用前要認(rèn)真檢查，生蟲(chóng)、發(fā)霉和不新鮮的不能使用，昆蟲(chóng)的代謝物和霉菌產(chǎn)生的毒素都對(duì)平菇菌絲有毒害作用。不夠潔凈的瓊脂要事先浸泡沖洗去雜。

（2）稱量：

培養(yǎng)基配方中標(biāo)出的水1000ml，實(shí)際上是將各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)都容于水后的營(yíng)養(yǎng)液的容量，而不完全是水。配制好后，最后總?cè)萘窟_(dá)到1000ml。

（3）調(diào)配：

植物體材料煮沸用其汁，一般煮沸20~30min，用2~4層紗布過(guò)濾。如馬鈴薯、玉米粉、木屑、麥麩等。難溶解的物質(zhì)先溶解，如蛋白胨，然后再加入易溶解的物質(zhì)?；瘜W(xué)試劑后加入，不斷攪拌使其均勻，而不與植物體材料一起煮沸。如葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂等。

在水煮取汁的過(guò)程中，水不足時(shí)可加水至足量，調(diào)配到最后，容量不足時(shí)可加水補(bǔ)足至1000ml。

（4）調(diào)節(jié)pH：

不同平菇品種生長(zhǎng)發(fā)育最適pH不同，不同地區(qū)，不同水源的pH也不同。因此，需要調(diào)節(jié)。通常先用pH試紙測(cè)定已調(diào)配好的培養(yǎng)基，然后再用稀酸或稀堿溶液調(diào)節(jié)。平菇一級(jí)種的pH調(diào)節(jié)常用的酸性溶液是檸檬酸和乙酸溶液，常用的稀堿溶液是碳酸氫鈉和碳酸鈉液。

（5）分裝：

培養(yǎng)基調(diào)配好后，調(diào)節(jié)好pH即可分裝。一級(jí)種常用的是玻璃試管，規(guī)格為18~20cm（長(zhǎng)）18~20mm（口徑）。分裝試管的裝置可以使用漏斗式分裝器，也可以自行設(shè)計(jì)使用倒“V”字形虹吸式分裝器。分裝時(shí)，在漏斗中或燒杯中加滿培養(yǎng)基。這后一種分裝器，分裝前要用吸球先將培養(yǎng)基吸至低于燒杯中培養(yǎng)基的液面，然后才能分裝。一手執(zhí)自由夾控制培養(yǎng)基的流動(dòng)，另一手執(zhí)試管接受流下來(lái)的培養(yǎng)基，達(dá)到所需量時(shí)，關(guān)閉自由夾。如此反復(fù)分裝至完畢。分裝時(shí)要注意：①流出的培養(yǎng)基不要沾在近管口的壁上，以防日后棉塞生霉，一旦管口附近沾有培養(yǎng)基，待凝固后用接種鉤扒出，并用潮濕潔凈的紗布擦拭干凈；②培養(yǎng)基裝至試管的1/5~1/4處，不可過(guò)少，也不必過(guò)多。

分裝完畢后加蓋棉塞。棉塞要用干凈的新棉花制做。棉塞要上下粗細(xì)均勻，松緊合適，以塞好后手提時(shí)不掉為宜。棉塞的長(zhǎng)度以塞入試管內(nèi)1.5~2.0cm,外露1.5cm左右為宜。然后7支或10支捆成一捆，管口端用牛皮紙或防潮紙包好扎緊，以防滅菌時(shí)冷凝水打濕棉塞。

（6）滅菌：

試管分裝打捆后，豎立于滅菌鍋內(nèi)滅菌。這是培養(yǎng)基制備的重要一步。滅菌效果是否良好,是關(guān)系到培養(yǎng)基能否使用的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。這一步既要求滅菌徹底，又要求營(yíng)養(yǎng)成分不致改變。因此，要使用高壓蒸汽滅菌。

使用高壓鍋滅菌時(shí)，要先加足水，將試管豎直碼放，加蓋擰好，然后接通熱源加熱。由于不同型號(hào)的高壓鍋內(nèi)部構(gòu)造不完全相同，所以，使用中的操作要嚴(yán)格按產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行。當(dāng)壓力達(dá)到0.1~0.11MPa開(kāi)始計(jì)時(shí)，保持這一壓力30min，即可達(dá)到滅菌目的。滅菌完畢后，待壓力降至零后排氣、開(kāi)蓋，將培養(yǎng)基趁熱擺成斜面。待凝固后，抽取10~20支試管斜面于28℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24~28h，以檢查滅菌效果。培養(yǎng)后若培養(yǎng)基表面無(wú)微生物生長(zhǎng)，表明滅菌成功，可以使用。如有微生物出現(xiàn)，則滅菌不徹底，不能使用，要再行滅菌后倒出，洗滌試管，重新制備。當(dāng)時(shí)不用的試管斜面可保存在清潔干燥避光的地方，以備隨時(shí)取用。制備一級(jí)種培養(yǎng)基時(shí)，配制和滅菌要緊密銜接，不可隔夜滅菌。

可以用來(lái)制備平菇一級(jí)種的培養(yǎng)基很多，常用的有PDA培養(yǎng)基、PDA綜合培養(yǎng)基、PDYA綜合培養(yǎng)基、PDPA綜合培養(yǎng)基、木屑綜合培養(yǎng)基、麥麩綜合培養(yǎng)基、玉米粉綜合培養(yǎng)基等。